貨號：SC705011
規(guī)格：50測試/盒
【產(chǎn)品概述】
核酸水解凝膠電泳法和紫外分光光度計法是Rnase檢測領(lǐng)域中比較常用的檢測方法。核酸水解凝膠電泳法受實驗人員主觀判斷影響較大，無法準確定量，操作時間長，測定通量較低。核酸水解紫外分光光度法的靈敏度低，不適合微量核酸酶殘留的活性檢測。
本試劑盒以RNA探針為底物，當(dāng)檢品中存在核糖核酸酶時，RNA探針被降解，標記在探針上的熒光基團與淬滅基團分離（詳見圖1），產(chǎn)生熒光，該方法具有操作簡便、準確性高、重復(fù)性好及高靈敏度等優(yōu)點，可根據(jù)需求自由選擇進行定性或定量檢測。
（圖1 檢測原理圖）
（圖2 RNA酶活性殘留檢測試劑盒定量標準品檢測曲線圖）
（圖3 RNA酶活性殘留檢測試劑盒定量標準曲線）
【產(chǎn)品特點】
1. 簡便：樣品制備及檢測操作簡單，一個小時內(nèi)即可得到檢測結(jié)果。
2. 準確：試劑盒檢測原理基于底物RNA探針，無非特異性交叉反應(yīng)，具有高準確性的特點。
3. 靈敏：試劑盒具有高靈敏度的特點，可以檢測低至0.5 ng/ml的RNase樣品。
4. 穩(wěn)定：檢測過程于微量PCR管中閉管操作，不受環(huán)境因素影響，結(jié)果穩(wěn)定，重復(fù)性高。
5. 靈活：檢測方式靈活，可根據(jù)需求自由選擇進行定性或定量檢測。
【RNase簡介】
核糖核酸酶（簡稱RNase）是一類能夠催化RNA水解反應(yīng)的酶。RNase在生物體內(nèi)或外源環(huán)境中廣泛存在，能夠?qū)NA進行大小、位置不同的切割，解除RNA中的化學(xué)鍵。在生物體內(nèi)，RNase起到調(diào)控RNA代謝、穩(wěn)定性等作用，因此在細胞內(nèi)RNase活性的調(diào)控和平衡是維護正常生物功能的必要條件。RNase在生命科學(xué)研究中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，包括基因表達、RNA質(zhì)量控制、RNA代謝和RNA調(diào)解等方面。
RNase根據(jù)其反應(yīng)機理和物理性質(zhì)可以分為RNA內(nèi)切酶和RNA外切酶。RNA內(nèi)切酶包括多種不同類型的內(nèi)切酶，如RNase T1、RNase T2、RNase A、RNase B、RNase H和RNase P等，可以將RNA分子的主鏈切斷成短鏈和單鏈產(chǎn)物。RNA外切酶可將RNA分子降解為短鏈和單鏈產(chǎn)物，主要包括RNase E、RNase J、RNase III和RNase PH等。
RNase在生物學(xué)研究中起著至關(guān)重要的作用。它可以消除或剪切mRNA中的異常區(qū)域，保證RNA質(zhì)量的穩(wěn)定性和完整性。RNase也可以促進基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，使得DNA和RNA的信息能夠順利傳導(dǎo)和表達。此外，RNase在RNA代謝和RNA穩(wěn)定性方面也具有重要作用。在細胞凋亡過程中，RNase能夠分解RNA和DNA，起到“自吞噬”的作用。在細胞生長和分裂過程中，RNase直接參與RNA的合成和轉(zhuǎn)錄過程，進而控制基因表達水平，維持生命的運轉(zhuǎn)。
RNase在醫(yī)學(xué)中也有許多應(yīng)用。例如，因為RNase能夠促進基因表達和轉(zhuǎn)錄，它可以用于腫瘤治療中。研究表明，一些腫瘤細胞中的RNA水平非常高，導(dǎo)致腫瘤細胞的生長和繁殖。因此，使用RNase可以消除多余的RNA，從而抑制腫瘤細胞生長。其次，RNase還可以用于處理一些遺傳疾病，如囊性纖維化等。通過將RNase引入患有囊性纖維化的人體內(nèi)，這種疾病對呼吸系統(tǒng)和消化系統(tǒng)的嚴重破壞可以得到一定程度的改善。
【RNase殘留的危害】
（1）實驗室
RNase殘留會對分子生物學(xué)分析和實驗結(jié)果產(chǎn)生嚴重危害，首先，RNase可以降解RNA，并將其變得不可使用。即使只有微小量的RNase殘留，也可能對RNA樣本產(chǎn)生嚴重影響。這將導(dǎo)致假陰性結(jié)果，數(shù)據(jù)不準確，實驗結(jié)果不可靠。RNase殘留會干擾RNA樣本的純化和反轉(zhuǎn)錄過程，從而影響實驗結(jié)果的準確性。在反轉(zhuǎn)錄的過程中，RNase會降解RNA，從而使反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中的RNA沒有被轉(zhuǎn)錄成對應(yīng)的DNA。RNase在室溫下可存活數(shù)周，這些殘留物可能會污染實驗室環(huán)境，如實驗設(shè)備、試劑、手套、實驗服和其他實驗器具。
在實驗室中，為了避免RNase污染，需要特別注意對實驗室環(huán)境的衛(wèi)生管理、器械的消毒、實驗操作員的清潔等方面，使用RNase-free的相關(guān)實驗耗材，以及定期對環(huán)境和相關(guān)耗材進行RNase殘留的監(jiān)控。
（2）生物制品生產(chǎn)企業(yè)
生物制品的生產(chǎn)過程中存在著多種雜質(zhì)，例如質(zhì)粒DNA、蛋白酶和RNase等。其中RNase活性極強，微量殘留即可導(dǎo)致大量RNA的降解。RNase污染分為內(nèi)源性和外源性兩種，內(nèi)源性污染指生物樣本中含有的內(nèi)源性RNase，可通過樣本處理或添加RNase抑制劑/滅活劑來處理，而外源性污染來自于環(huán)境中的水、緩沖液、實驗器皿等表面，源頭廣泛，包括微生物、人體毛發(fā)、皮膚碎屑和汗液等。同時，在部分生物制品的生產(chǎn)工藝流程中也會添加核酸酶，從而引入外源性核酸酶。
生物制品中殘留的核酸酶會對產(chǎn)品的質(zhì)量產(chǎn)生極大影響，以mRNA疫苗的生產(chǎn)為例，在生產(chǎn)過程中殘留的RNaseA、宿主菌DNA、宿主菌RNA和宿主蛋白等，它們都會顯著影響體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)和轉(zhuǎn)錄mRNA的質(zhì)量，需對產(chǎn)品的純度進行嚴格的把關(guān)。
我國在《細胞治療產(chǎn)品研究與評價技術(shù)指導(dǎo)原則》、《人用基因治療制品總論》、《細胞治療產(chǎn)品研究與評價技術(shù)指導(dǎo)原則》等法規(guī)中做出了針對核酸酶等雜質(zhì)的相關(guān)規(guī)定，此外，歐洲藥品監(jiān)督管理局也出臺了相應(yīng)的法規(guī)要求。
【應(yīng)用場景】
1）生物耗材RNase殘留檢測
2）生物試劑RNase殘留檢測
3）生物制品（疫苗、干細胞等）RNase殘留檢測等
【應(yīng)用單位】
電話：180 5151 0760 唐先生
郵箱：techstar@tech-star.cn
